12、设置为细胞悬液,先将缓冲液吸入至质粒管中,二者混匀后转移至细胞细胞悬液内,三者混匀。0016 本发明相对于现有技术具有如下的优点在于:0017 其一.使1X 电转液:加蒸馏水溶解定容至1000 mL 溶解后4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用3~5 次。TBS 缓冲液加蒸馏水溶解,冰醋酸调pH 至7.2,定容至1000 mL。室温保存。洗脱液TBST 溶
≥﹏≤ 1、电转液:称取Tris-Base 18.2g,甘氨酸86.5g,先加4L水溶解,再加甲醇1200ml, 定容至6L。2、10×TN:称取NaCl 438.3g, Tris 60.57g, 加入浓盐酸调节至PH 8.0,定容至5L 。3、封步骤1. 切胶并转移至电转液中。步骤2. 按如下顺序安装转膜槽样品夹板黑板(最下方)→海绵垫→滤纸→胶→PVDF膜(甲醇提前浸泡激活,30s)→滤纸→海绵垫→白板→
1、配液用水最好是蒸馏水,也可用软化水,最低限度应是经过净置后去掉沉淀物的生活用水,水与电液粉的比例为5%,电阻溶剂即电液粉,由基本按两倍的需要提供。2、电1)10x 电泳液:Tris Base 30.3g、Glycine 144g和SDS 10g,量取800ml ddH20,充分搅拌溶解后,定容至1L;2)10x 电转液:Tris Base 30.3g、Glycine 144g,量取800ml ddH20,充分搅
5%封闭液配制50ml:2.5g脱脂奶粉用50mlTBST溶解(-20℃保存)一般配置15~25ml,现配现用(放在振荡器上震荡摇匀后放到摇匀器上80rpm左右等1h电转完成后直接用封闭) 电转液:100ml母液+700ml蒸馏水+200ml甲醇1) 将用于转膜的PVDF膜置于100%甲醇浸透10 sec-15sec; 2) 将配置好的转膜缓冲液倒入平底托盘之中,将两张滤纸及浸透的PVDF膜转移至转膜缓冲液中浸泡; 3